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第200章 35%(感谢niu津面的盟主)(1/3)

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    35(谢津面的盟主!)

    学校的实验室条件没那么好。

    空调老化,地方不大,房间里人也有多。

    条件算是艰苦吧,大家却一不觉得累,一个个血沸腾的,就想着快把这个项目来。

    陈浩上次这么有动力的时候还是在大二夏天,跟老江去参加网吧举办的cs16网吧赛。

    时过境迁。

    曾经的4网瘾少年,现在已经变成使用移枪的手了。

    蔡卓群将无酶,打离心底,反复打。

    王晓晴观察片刻后说:“测一吧。”

    蔡卓群,枪,拿着样本走到nanodrop分光光度计前。

    用移枪取了1微升样本,滴在检测基座上,放检测臂,在连接的旧台式电脑上击了测量。

    屏幕上很快了数据。

    陆晓林停了手里的活,转问:“多少?”

    蔡卓群:“度12ng/ul,a260/280比值是132,a260/230比值是07。”

    王晓晴盯着屏幕看了一会儿,有无奈:“这已经是第四批废样了……”

    项目的难度远远超除江河外所有人的预期。

    虽然之前江河用加d的方法,解决了pcr扩增阶段引二聚的问题。

    但解决了一个问题,接来还会现更多的问题……

    现在的瓶颈,卡在了提取上。

    irna在血中的量极低,且非常容易被血中的rna酶降解。

    纯度不够。

    a260/280的比值正常应该在18到20之间,低于18就意味着样本中存在大量的白质污染。

    而a260/230比值只有07,更是说明里面混了大量的酚类质或者盐离。

    用这样本去一步的逆转录,杂质会让逆转录酶失活,后面的pcr扩增本跑不真实数据。

    蔡卓群试图寻找原因:“王教授,是不是氯仿的用量不够?我们在取上清的时候,可能还是带了一些中间层的白质。”

    王晓晴摇摇:“上一批我们已经把氯仿的比例提了百分之二十,离心时间也延了五分钟,纯度是稍微好了一,但是度直接掉到了5ng/ul以。”

    陆晓林在一旁分析:“血清里全是白,游离的酸少,trizol提取法,用在血清上,天生就有缺陷。”

    实验室众人,陷沉默。

    其实在后世,有专门针对血清的提法商业试剂盒,傻瓜式作,半个小时就能得到纯度的irna。

    但在08年,专门针对活检的试剂盒在国本买不到,就算买到了技术也还远未成熟,所以只能用最基础的化学试剂,手工一步步去抠。

    蔡卓群问:“王教授,有什么办法没?”

    王晓晴:“别问我,江河呢?江河去哪儿了?”

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